| 연구목표 |
본 연구의 목표는 치료용 단백질을 고효율로 대량생산할 수 있는 human embryonic kidney (HEK) 기반의 새로운 인간 세포주를 설계하고, 빠르게 구축하는 것임. 이 목표를 달성하기 위하여, 첫째로, 기존의 무작위 유전자 삽입 (random integration)을 이용한 재조합 생산 HEK 세포주 제조 방식의 비효율성을 극복하기 위해, cl... |
| 연구내용 |
1차년도1. 위치 특이적 삽입을 활용한 인간 유래 세포주를 구축하기 위해 CRISPR/Cas9 시스템을 활용하기 위한 vector를 제작함.2. 기존의 연구를 통해 인간 세포에서 고안정성 유전자 발현 부위로 알려진 AAVS1, CCR5, ROSA26 locus를 타겟하기 위한 벡터를 제작한 후 클론 세포주를 구축하고 이를 검증함.3. 생산 세포주를 회분식 ... |
| 기대효과 |
급속도로 성장을 거듭하고 있는 치료용 단백질 시장에서 대부분의 발현 시스템은 설치류 유래인 CHO 세포주를 기반으로 하고 있음. 인간유래 세포는 CHO 세포와 비교하여 PTM에 관여하는 효소에 차이가 있어 만들어진 단백질의 활성이 CHO 세포에서 생산된 단백질과 다름. 따라서 인간 유래 HEK 세포를 이용한 단백질의 생산 기술은 이후 CHO 세포에서 생산하... |
| 키워드 |
인간세포,위치 특이적 삽입,유전자 가위,재조합 효소 기반 카세트 교환,차세대 유전체 시퀀싱,다중 유전자 삽입 |